1. 2015年版《中國(guó)藥典》的修訂介紹
答：《中國(guó)藥典》是國(guó)家為保證藥品質(zhì)量可控、確保人民用藥安全有效而依法制定的藥品法典，是藥品研制、生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)、使用和管理都必須嚴(yán)格遵守的法定依據(jù)，是國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)體系的核心。2015年版《中國(guó)藥典》是新中國(guó)成立以來的第10版藥典。2010年3月第十屆藥典委員會(huì)組建成立，歷時(shí)5年完成新版藥典編制工作。編制期間，所有藥典的修訂內(nèi)容均在網(wǎng)上公示并征求意見，共收到網(wǎng)上反饋意見4000余條，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過歷版藥典收到反饋意見的數(shù)量，反映了社會(huì)、公眾對(duì)新版藥典編制的關(guān)注度和參與度不斷提高。針對(duì)各類反饋意見，藥典委員會(huì)各專業(yè)委員會(huì)逐條研究討論，組織召開標(biāo)準(zhǔn)審議會(huì)議700余次，并向社會(huì)進(jìn)行了意見反饋?？梢哉f，2015年版《中國(guó)藥典》既體現(xiàn)了第十屆藥典委員會(huì)全體委員、廣大專家學(xué)者、藥品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)、科研院所、大專院校、藥品生產(chǎn)企業(yè)的心血，也包含了社會(huì)公眾的共同智慧。
2. 2015版藥典實(shí)施詳情
答：新版《中國(guó)藥典》2015年12月1日施行，每五年發(fā)布一版藥典。自實(shí)施之日起，已上市的藥品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)就應(yīng)當(dāng)符合2015版《中國(guó)藥典》收載的品種項(xiàng)下的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)已經(jīng)上市的但是在2015版藥典未收載的該品種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，也應(yīng)當(dāng)符合《中國(guó)藥典》通則的相關(guān)要求。在我們已經(jīng)提交了注冊(cè)申請(qǐng)的這些品種，還沒有經(jīng)過批準(zhǔn)的，在批準(zhǔn)時(shí)也應(yīng)該要求他們符合2015版藥典標(biāo)準(zhǔn)的相關(guān)要求。
3. 2015年版《中國(guó)藥典》的主要變化有哪些？
答：一是收載品種增幅達(dá)到27.4%。2015版藥典擬收載5800個(gè)品種，比2010版藥典增加1200多個(gè)，修訂品種751個(gè)。
二是通過藥典凡例、通則、總論的全面增修訂，從整體上進(jìn)一步提升了對(duì)藥品質(zhì)量控制的要求，完善了藥典標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)規(guī)定，使藥典標(biāo)準(zhǔn)更加系統(tǒng)化、規(guī)范化。
三是健全了藥品標(biāo)準(zhǔn)體系。特別是藥用輔料品種增加至260個(gè)，新增相關(guān)指導(dǎo)原則;在歸納、驗(yàn)證和規(guī)范的基礎(chǔ)上實(shí)現(xiàn)了《中國(guó)藥典》各部共性檢測(cè)方法的協(xié)調(diào)統(tǒng)一。
四是2015版藥典附錄(通則)、輔料獨(dú)立成卷，構(gòu)成《中國(guó)藥典》四部的主要內(nèi)容。
五是藥用輔料品種收載數(shù)量顯著增加。擬新增128個(gè)，共計(jì)260個(gè)，增長(zhǎng)率高達(dá)97%。
六是安全性控制項(xiàng)目大幅提升。
中藥：制定了中藥材及飲片中二氧化硫殘留量限度標(biāo)準(zhǔn)，推進(jìn)建立和完善重金屬及有害元素、黃曲霉毒素、農(nóng)藥殘留量等物質(zhì)的檢測(cè)限度標(biāo)準(zhǔn);加強(qiáng)對(duì)重金屬以及中藥材的有毒有害物質(zhì)的控制等。
化學(xué)藥：有關(guān)物質(zhì)加強(qiáng)了雜質(zhì)定性和定量測(cè)定方法的研究，實(shí)現(xiàn)對(duì)已知雜質(zhì)和未知雜質(zhì)的區(qū)別控制，優(yōu)化抗生素聚合物測(cè)定方法，設(shè)定合理的控制限度，整體上進(jìn)一步提高有關(guān)物質(zhì)項(xiàng)目的科學(xué)性和合理性等。
生物制品：增加相關(guān)總論的要求，嚴(yán)格生物制品全過程質(zhì)量控制要求，以保證產(chǎn)品的安全有效性，同時(shí)增訂“生物制品生產(chǎn)用原輔材料質(zhì)量控制通用性技術(shù)要求”，加強(qiáng)源頭控制，最大限度降低安全性風(fēng)險(xiǎn)等。
七是進(jìn)一步加強(qiáng)有效性控制。中藥材加強(qiáng)了專屬性鑒別和含量測(cè)定項(xiàng)設(shè)定?；瘜W(xué)藥適當(dāng)增加了控制制劑有效性的指標(biāo)，研究建立科學(xué)合理的檢查方法。生物制品進(jìn)一步提高效力測(cè)定檢測(cè)方法的規(guī)范性，加強(qiáng)體外法替代體內(nèi)法效力測(cè)定方法的研究與應(yīng)用，保證效力測(cè)定方法的準(zhǔn)確性和可操作性。
4. 以第五代菌做陽性對(duì)照，實(shí)驗(yàn)過程中的接種按藥典應(yīng)該也算傳代，那是否算是第六代菌呢？
答：依然算第五代(接種的菌株算第5代，培養(yǎng)后算第6代)
5. 藥典規(guī)定只能傳代五次，此次實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否有效？
答：有效
6. 現(xiàn)在有無對(duì)照菌種可以購買？聯(lián)絡(luò)電話？
答：省藥檢所業(yè)務(wù)科銷售藥典規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)菌株，為第二代甘油凍存管，電話：020-81854392
7. 菌種發(fā)放單應(yīng)包括什么信息？
答：根據(jù)自己工作的需要，大致包括：菌種名稱，編號(hào)，來源，接收日期，接收人等。
8. 如何檢查黑曲霉孢子懸浮液孢子含量為50~100個(gè)／ml。銅綠假單胞菌單菌如果用甘油冷凍管，也是低溫，是否也會(huì)影響它的活性？應(yīng)如何保存？
答：可用玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基或改良馬丁瓊脂來確定黑曲霉孢子懸浮液。銅綠假單胞菌應(yīng)使用最終甘油濃度為20%的甘油凍存管保存，保存在-30℃或更低溫度，則可保持其活性。若是斜面或營(yíng)養(yǎng)肉湯，建議室溫保存。
9. 工作菌株，2-8℃下可連續(xù)使用一周，這里的工作菌株是指原液還是制備好的菌懸液。為何工作菌株不低溫存放，而是2-8℃？
答：首先要說明，所有的操作應(yīng)按藥典要求來操作，這里的工作菌株指原液，工作菌株建議在2-8℃保存，但要注意的是，銅綠假單胞菌的工作菌液不能低溫保存，低溫會(huì)損傷其活性。
10. 簡(jiǎn)單方便的厭氧培養(yǎng)方案？
答：硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基；固體培養(yǎng)基的話可考慮使用一次性厭氧袋。
11. 三糖鐵斜面穿刺會(huì)斷層，這是為什么？
答：產(chǎn)氣菌產(chǎn)氣使培養(yǎng)基斷層，或培養(yǎng)基本身質(zhì)量問題。
12. 第一代菌種可不可以作為工作菌株使用？
答：建議不這樣使用，因?yàn)閾?dān)心菌株沒有充分復(fù)壯，生化特性可能不典型。
13. 制備菌懸液時(shí)，要使其在10~100cfu中，應(yīng)多注意的地方是什么？
答：制定標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程，減少不同實(shí)驗(yàn)者帶來的誤差，接種量、培養(yǎng)溫度和時(shí)間應(yīng)每次一致。
14. 黑曲霉的存放期如何驗(yàn)證？
答：通過孢子懸液計(jì)數(shù)和菌落特征，進(jìn)行驗(yàn)證。
15. 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株必須進(jìn)行純度和特性確認(rèn)？還是在必要情況下才做？
答：詳見《中國(guó)藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范》2010版341頁，建議在制備標(biāo)準(zhǔn)貯備菌液前進(jìn)行純度和特性確認(rèn)，最好在使用前再進(jìn)行純度和特性確認(rèn)。
16. 銅綠假單胞菌貯存溫度應(yīng)為多少度？
答：一般在10℃以上，甘油凍存管至少在-30℃以下。
17. 制備工作菌種進(jìn)行菌種保藏中的保存期是否要進(jìn)行驗(yàn)證？
答：可參考2010年版《中國(guó)藥典》標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP），應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證。
18. 斜面低溫保藏法：每一次的菌種傳代都需要做菌種純度鑒定嗎？
答：建議制備斜面保存管前進(jìn)行菌種純度鑒定，以后的每次傳代視具體情況而定。
19. 如何比較快速有效判斷菌液的濃度？除了可以用“比濁儀”參考，還有什么方法？
答：比濁儀只做輔助參考，還需通過平板計(jì)數(shù)來最后確認(rèn)菌液的濃度。
20. 曾于中檢所中購買過黑曲霉的0代包子懸液，說明書上表示應(yīng)于-20℃中保存，可保存一年，對(duì)于此保存唯獨(dú)及效期，藥企可否同法保存自制的黑曲霉孢子懸液？是否要驗(yàn)證？如何驗(yàn)證？
答：黑曲霉孢子懸液制備請(qǐng)參照2010版藥典的相關(guān)內(nèi)容。關(guān)于驗(yàn)證在前面的問題中已經(jīng)回復(fù)。
21. 菌種斜面最多能保存菌幾代？經(jīng)冰箱保存的斜面菌種是否需復(fù)蘇二次才能進(jìn)行菌懸液配制？
答：藥典規(guī)定，菌種傳代不應(yīng)超過5代。冰箱保存的斜面菌種復(fù)蘇后即可使用。
22. 哥倫比亞血瓊脂平皿生長(zhǎng)的菌落，對(duì)氧化酶試驗(yàn)是否有影響？菌懸液的制備過程中，接種菌種新鮮培養(yǎng)物至營(yíng)養(yǎng)肉湯或營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中，這個(gè)新鮮培養(yǎng)物怎么理解，冰箱保存斜面菌種是新鮮培養(yǎng)物嗎？
答：沒使用過哥倫比亞血瓊脂及相關(guān)實(shí)驗(yàn)。新鮮培養(yǎng)物指剛培養(yǎng)好的菌株，冰箱保存斜面菌種不算新鮮培養(yǎng)物。
23. 大腸埃希菌鏡檢時(shí)，有時(shí)固定好的菌在染色過程中脫落，請(qǐng)問是什么原因引起這種情況？
答：首先，洗干凈撥片，挑菌注意不要太多，待菌固定好后再進(jìn)行染色。
24. 生孢梭菌，菌落培養(yǎng)計(jì)數(shù)時(shí)一定要在厭氧條件下進(jìn)行嗎？
答：是
25. 為什么有時(shí)候細(xì)菌管會(huì)長(zhǎng)真菌，而真菌管也會(huì)長(zhǎng)細(xì)菌。
答：原因可能是多方面的，某些細(xì)菌適宜在真菌培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，而某些真菌也能在細(xì)菌培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。比如2010版藥典無菌檢查法，兩種培養(yǎng)基的使用范圍已刪去，已不是絕對(duì)的細(xì)菌培養(yǎng)基或真菌培養(yǎng)基。
26. 在做方法驗(yàn)證時(shí)，黑曲霉菌濃度大于20cfu/皿時(shí)，培養(yǎng)5天后菌落蔓延擴(kuò)散，無法各個(gè)區(qū)分，如何在藥典要求的50~100cfu和實(shí)際操作結(jié)果中找到平衡？因?yàn)榫鷿鈱?duì)回收率及操作RSD%影響很多.
答：培養(yǎng)48-72h后，菌落剛形成時(shí)，及時(shí)點(diǎn)計(jì)并做記號(hào)，然后每天觀察有無新的菌落長(zhǎng)出并計(jì)數(shù)。
27. 標(biāo)準(zhǔn)菌黑曲霉在傳代前需要先接到改良馬丁培養(yǎng)基復(fù)蘇后，再傳代，如果需要，接到改良馬丁培養(yǎng)基后培養(yǎng)時(shí)間怎么定？
答：2010版藥典規(guī)定 ，黑曲霉傳代，培養(yǎng)時(shí)間為5~7天
28. 有時(shí)候在玫瑰紅鈉瓊脂或營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上生長(zhǎng)有酵母菌，在酵母菌生長(zhǎng)的位置底部產(chǎn)生了一個(gè)氣泡狀的圓形，把底部的瓊脂都貢起來了，又或者表面沒有任何菌落，而瓊脂被貢起來，請(qǐng)問這種圓形氣泡是菌嗎？在計(jì)數(shù)時(shí)是否也把它算入酵母菌？
答：建議挑取氣泡內(nèi)含物接種至改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基中，若能生長(zhǎng)，且為酵母菌的菌落形態(tài)，應(yīng)該可以將其算入酵母菌。
29. 大腸生化實(shí)驗(yàn)中的靛基質(zhì)試驗(yàn)（I）項(xiàng)結(jié)果為“ ”或者“-”均不影響最終結(jié)果的判斷，請(qǐng)問該項(xiàng)的意義何在？是否可以取消？
答：反應(yīng)為 ，為典型大腸埃希氏菌，-為非典型大腸埃希菌。關(guān)系到最終判斷，都是必須的實(shí)驗(yàn)，不可取消。
30. 生化檢查用的鑒定盒是否需要跟培養(yǎng)基一樣做適用性檢查？如果需要做，應(yīng)該如何進(jìn)行？
答：用陽性菌做一次，實(shí)驗(yàn)結(jié)果相符即可。
31. 銅綠假單胞菌用什么方法保存及更活處理方法？
答：建議采用甘油凍存管（終濃度為20%的甘油凍存管），-30℃（或更低溫度）保存。
32. 菌株的純度和特性要多久確認(rèn)一次，最短時(shí)間和最長(zhǎng)時(shí)間分別是多少？
答：做標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株之前務(wù)必要進(jìn)行鑒定，其它根據(jù)實(shí)際情況：如污染、活性下降、儲(chǔ)存條件發(fā)生改變等。
33. 革蘭氏染色前，菌落是否要先純化（接到營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面上）還是直接從選擇性培養(yǎng)基上挑起菌落直接染色？
答：要純化，從選擇性培養(yǎng)基挑取單個(gè)菌落，最好先接到營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面后，再進(jìn)行染色。
34. 供試品傳入無菌，對(duì)表面進(jìn)行消毒。用75%無菌酒精浸泡表面是否可行？可用如何方法。（等紫外照射1h 酒精噴射，是否可行？注：無緩沖間的情況。從一般區(qū)直接進(jìn)入傳遞窗）
答：用75%無菌酒精浸泡表面應(yīng)該可行，但酒精易燃。 可用普通消毒劑如新潔爾滅等消毒。
35. 無菌實(shí)驗(yàn)供試品在傳入無菌傳遞窗前能否泡消毒液？
答：視包裝而定。如：玻璃安瓿，可以；西林瓶，不可以。
36. 檢驗(yàn)針劑時(shí)，安瓿表面消毒可否用碘液浸泡作為消毒，如果可以，它會(huì)殺死樣品本身的微生物嗎？
答：我們沒有碘液浸泡消毒的經(jīng)驗(yàn)。 就浸泡方式而言，視包裝而定，如：玻璃安瓿，可以；西林瓶，不可以。
37. 微生物檢查樣品傳遞消毒處理，需作驗(yàn)證嗎?如何確定其消毒效果？
答：驗(yàn)證當(dāng)然最好，但也應(yīng)結(jié)合常識(shí)、經(jīng)驗(yàn)等，盡量減低工作量。
38. 藥典要求只要供試品的特性允許優(yōu)先考慮薄膜過濾法。對(duì)于小劑量無抑菌作用的注射劑，是直接接種法好還是薄膜過濾法好？
答：優(yōu)先考慮薄膜過濾法，可視樣品包裝情況而定。
39. 無菌檢查驗(yàn)證，2010年版方法改變，變換了大腸埃希桿菌，請(qǐng)問從前經(jīng)過驗(yàn)證的無菌檢查方法，實(shí)施2010年藥典時(shí)是否必須從新的驗(yàn)證方法進(jìn)行驗(yàn)證？驗(yàn)證后從能進(jìn)行無菌檢查？
答：應(yīng)重新驗(yàn)證。
40. 無菌制劑的處方與工藝都沒有改變，10版藥典出版是否還需重新驗(yàn)證？
答：10版用大腸埃希替代銅綠假單胞，應(yīng)重新驗(yàn)證。
41. 05版我們已經(jīng)做了方法驗(yàn)證，10版還要再做方法驗(yàn)證嗎？
答：如前所述。
42. 做陽性對(duì)照，為什么同是做5批檢樣，到最后只是兩到三批長(zhǎng)菌？原因出在哪？濾膜嗎？（我們是做抗菌素的產(chǎn)品）
答：原因是多方面的。請(qǐng)考慮方法的耐用性；此外，操作前后是否一致（比如：供試品溶液溶解是否徹底、供試品溶液的濃度是否一致、對(duì)濾膜濾筒的濕潤(rùn)、每次過濾對(duì)濾筒的蕩洗、抽干、抽干是否過久等等）等等都有可能是影響因素。
43. 清潔無菌室所用消毒液如何做到無菌拖把、拖桶如何做到無菌？
答：消毒液可采用過濾的方法。無菌拖把、拖桶可采用浸泡、高溫滅菌的方法。
44. 微生物的操作記錄，可否直接用電子版進(jìn)行記錄。也就是將操作結(jié)果及過程記錄在電子系統(tǒng)內(nèi)？如細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)間為72小時(shí)，在操作規(guī)程上可否寫成為72±2小時(shí)。生產(chǎn)企業(yè)可否將有菌種的檢查項(xiàng)目，如方法學(xué)驗(yàn)證、培養(yǎng)基適用性檢查委托有資格的單位檢驗(yàn)
答：可直接用電子版進(jìn)行記錄。 細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)間為72小時(shí)，建議在操作規(guī)程上寫成為72小時(shí)。生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)該可將有菌種的檢查項(xiàng)目，如方法學(xué)驗(yàn)證、培養(yǎng)基適用性檢查委托有資質(zhì)的單位檢驗(yàn)。
45. 高壓消毒爐的培訓(xùn)一般在哪里有舉行？
答：廣州：特種設(shè)備培訓(xùn)機(jī)構(gòu)鍋爐所
46. 化妝品微控的容器洗滌一般用什么洗滌較好？
答：表面活性劑
47. 貴所日常所用的消毒液是哪些？
答：新潔爾滅、消毒粉、75%酒精、來蘇兒。
48. 消毒液本來就是用來消毒殺菌的，又怎么會(huì)存在消毒液是否無菌這一說法？
答：消毒液不是萬能的，對(duì)絕大對(duì)數(shù)菌有效，不排除對(duì)有些微生物無效。 有些消毒劑質(zhì)量難保證，如果有效成分濃度過低甚至無，則達(dá)不到滅菌效果。
49. 能否直接用電磁爐煮培養(yǎng)基（加熱）？最佳加熱方法是？
答：電磁爐不能加熱玻璃瓶。我們所：水?。?00℃），微波爐
50. 硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基培養(yǎng)后會(huì)有點(diǎn)渾濁（排除是菌生長(zhǎng)），是否可以在滅菌之前過濾培養(yǎng)基?
答：找出培養(yǎng)基混濁的原因，若是培養(yǎng)基與樣品發(fā)生作用導(dǎo)致的混濁，滅菌之前過濾培養(yǎng)基也是沒用的。硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基含瓊脂，如果用濾膜，一般很難過濾；如果用紗布、棉花、濾紙等，則須考慮濾材對(duì)不同成分的吸附程度不同，可能造成培養(yǎng)基成分比例的改變。
51. 方法驗(yàn)證時(shí)：對(duì)照加的菌液是最后才加嗎？
答：按藥典，在最后一次沖洗液中加入。
52. 培養(yǎng)基適用性檢查無菌性檢查中“每批培養(yǎng)基隨機(jī)取不少于5支（瓶））中”中“每批”指脫水商品培養(yǎng)基的生產(chǎn)批次，還是指制備的批次？
答：指制備批次的培養(yǎng)基。
53. 微生物檢驗(yàn)用的各種試劑除了化學(xué)純，能否使用分析純？
答：可以。
54. 生物安全柜，凈化操作臺(tái)每年是否需要檢定？
答：是的，我所是每年檢定一次。并定期檢測(cè)潔凈度，頻次自己制訂。
55. 無菌操作時(shí)，對(duì)顯微鏡硬件條件的需求是怎樣？
答：顯微鏡：至少1000X，也就說要有油鏡。
56. 生產(chǎn)原料藥的公司，其微生物檢測(cè)方法采用限度檢查法，請(qǐng)問潔凈室的劃分中還需要建立“無菌檢查室”嗎？
答：只要滿足藥典規(guī)定的萬級(jí)背景下的局部百級(jí)即可。
57. 陽性接種室，有沒有硬性要求在萬級(jí)區(qū)域局部百級(jí)區(qū)域？
答：無硬性要求。但應(yīng)使用生物安全柜，并按生物安全柜的要求設(shè)置外圍空間。
58. 陽性操作間的空調(diào)系統(tǒng)是否應(yīng)與微生物限度檢查的空調(diào)系統(tǒng)完全分開，若未分開，是否可以采取直排的方式？（不利用陽性間的空調(diào)回風(fēng)）
答：應(yīng)分開。直排不等于分開。
59. 微生物限度實(shí)驗(yàn)室和陽性對(duì)照室的潔凈系統(tǒng)要分別獨(dú)立，如用同一套的HVAC，但都是全排，是否能接受？
答：應(yīng)分開。直排不等于分開。
60. 微生物與無菌潔凈系統(tǒng)也一定分別設(shè)置嗎？
答：有條件最好將微生物限度檢查與無菌檢查潔凈系統(tǒng)分開。
61. 潔凈區(qū)監(jiān)控中，某些設(shè)備不宜采用沖淋法和接觸碟法取樣，而擦拭法中棉簽釋放率很低（普通棉簽釋放率只有20%左右）。請(qǐng)問如何設(shè)計(jì)采樣方法才能真實(shí)反映設(shè)備表面微生物情況？
答：有些國(guó)外生產(chǎn)微生物檢驗(yàn)儀器的大公司，有專用的小拭子，可能更有效。
62. 用潔凈服材質(zhì)做成袋子來代替牛皮紙的包扎滅菌是否可行？
答：我們所目前采用此法。
63. 環(huán)境監(jiān)測(cè)用平皿預(yù)培養(yǎng)溫度和時(shí)間?
答：30-35℃，時(shí)間不少于48h
64. 靈敏度檢測(cè)如何確定接種菌數(shù)量？
答：菌液在接種至靈敏度檢測(cè)用培養(yǎng)基的同時(shí)用微生物限度檢查法的平皿法測(cè)定每1ml菌液的cfu。
65. 如何驗(yàn)證消毒劑消毒效果？
答：目前沒有統(tǒng)一的方法，自行設(shè)計(jì)。
66. 消毒劑消毒效果如何驗(yàn)證？如何設(shè)定SAL接受標(biāo)準(zhǔn)？
答：目前沒有統(tǒng)一的方法，自行設(shè)計(jì)。
67. 驗(yàn)證試驗(yàn)中，若供試品需加入β-內(nèi)酰胺酶，那么陽性對(duì)照管是否應(yīng)該加入等量β-內(nèi)酰胺酶？
答：驗(yàn)證試驗(yàn)時(shí)，不加，因?yàn)閷?duì)照管是用于比較試驗(yàn)菌生長(zhǎng)情況的。 檢驗(yàn)時(shí)的陽性對(duì)照則加。
68. 全封閉式無菌驗(yàn)證中，用0.9%Nacl溶液溶解后，抽入集菌器中，樣品溶液是否要停留幾秒鐘？讓樣品與濾膜充分接觸或者停留后溶液造成抗生素殘角？如何停留幾秒鐘？應(yīng)在100ml試停留還是50ml時(shí)停留合適？
答：不應(yīng)停留，應(yīng)讓樣品盡快通過，避免抑菌成分被吸附。薄膜過濾法的目的是僅讓微生物截留在濾膜上。
69. 每張濾膜每次沖洗量一般100ml，總沖洗量不得超過1000ml，若供試品容量較大，總供試品樣品量按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定超過1000ml，那這種情況應(yīng)如何看待呢？
答：中國(guó)藥典未規(guī)定供試品溶液的體積，設(shè)計(jì)檢驗(yàn)方法時(shí)，兼顧供試品溶液的濃度和體積，盡量采用較小的體積。
70. 裝消毒劑的容器是否要求滅菌？例如用可滅菌的不銹鋼材質(zhì)，因?yàn)樗芰系娜萜鞑荒軠缇鷨栴}。
答：應(yīng)該滅菌
71. 配制用水最長(zhǎng)可以放置多久？
答：視放置條件，經(jīng)驗(yàn)證，自己設(shè)定。
72. 對(duì)滅菌效果進(jìn)行驗(yàn)證，多久進(jìn)行一次？
答：根據(jù)自己工作情況，自己制訂。
73. 微生物限度檢查時(shí)所用吸管是否均需計(jì)量？
答：無規(guī)定。
74. 無菌，微生物限度實(shí)驗(yàn)，樣品與陽性對(duì)照可以共用一個(gè)培養(yǎng)箱嗎？
答：有2種意見：其一，條件許可，分開，以免污染；其二，共用一個(gè)培養(yǎng)箱，使其在相同條件下培養(yǎng)。 我們：分開。
75.在無菌檢查項(xiàng)下，供試品檢驗(yàn)時(shí)，陽性對(duì)照是否必須每批都需做？是否供試品無菌試驗(yàn)跟陽性對(duì)照必須同步操作？
答：ChP要，同步。
76. 生產(chǎn)企業(yè)一次生產(chǎn)80mg/瓶的凍干粉36000瓶，企業(yè)取20瓶做無菌檢驗(yàn)，是否應(yīng)另增加10瓶做陽性試驗(yàn)？（方法：薄膜過濾法，濾膜三分法，一份陽性，另兩份置兩種不同培養(yǎng)基中。
答：是，總共需30瓶。
77. 培養(yǎng)基靈敏度試驗(yàn)所用的菌種有6種，為什么沒有大腸？
答：有專家解釋：因銅綠與大腸均為革蘭氏陰性桿菌，而銅綠在醫(yī)院及自然界中更廣泛存在，致病性更強(qiáng)。
78. 如果產(chǎn)品經(jīng)無菌驗(yàn)證后，是以大腸為對(duì)照菌時(shí)，可行嗎？
答：如果驗(yàn)證6種菌均可行，建議按藥典陽性對(duì)照章節(jié)的要求，設(shè)定陽性對(duì)照菌。
79. 如果驗(yàn)證結(jié)果樣品是抗革蘭陰性菌的，則陽性菌應(yīng)用大腸埃希菌。靈敏度試驗(yàn)可要加入大腸？
答：否。
80. 薄膜過濾法中，菌懸液的加入，在最后一次的沖洗液中加入小于100cfu的試驗(yàn)菌，過濾，這個(gè)說法用封閉式過濾器（）要如何做？如果做法是加入培養(yǎng)基后，再從管子里加1ml的100cfu的菌，可行嗎？
答：在最后一次沖洗液中，經(jīng)封閉式過濾器頂部的透氣孔加入1ml的少于100cfu的菌液，抽干，再加培養(yǎng)基。
81. "全封閉式無菌檢驗(yàn)中，每張濾膜每次沖洗量一般為100ml，我們驗(yàn)證的是50ml*3 100ml*3，總沖洗量不超1000ml,可行嗎？"
答：可行。
82. 《中國(guó)藥典》無菌檢查方法驗(yàn)證中“菌種加在最后一次沖洗液中，過濾”，如果某供試品無菌檢查方法無需進(jìn)行沖洗，那么菌懸液應(yīng)該加在哪合適？
答：藥典無規(guī)定，可在過濾完樣品后直接加菌液，然后加入培養(yǎng)基。
83. "無菌驗(yàn)證后，試驗(yàn)菌數(shù)經(jīng)測(cè)定，若加入菌數(shù)大于100cfu,該情況如何處理？是否需要判斷其試驗(yàn)無效，重新驗(yàn)證"
答：重新驗(yàn)證。
84. 南方天氣濕度大，易發(fā)霉，毛巾或者衣服上可能有黑色的霉點(diǎn)洗不干凈，請(qǐng)問有沒有好的方法去除霉點(diǎn)？
答：漂白、消毒。
85. 粉針注射劑，同一個(gè)品種有不同規(guī)格的產(chǎn)品，在建立方法學(xué)驗(yàn)證時(shí)是否每個(gè)規(guī)格都需要進(jìn)行驗(yàn)證？
答：理論上，以最大規(guī)格建立的方法應(yīng)適用于其他較小規(guī)格。 但這樣做可能會(huì)提高成本，因小規(guī)格的沖洗量、滅活劑等用量可能可以更少，難以一概而論。
86. 無菌檢查方法中陰性對(duì)照，每瓶溶劑，稀釋液，沖洗液都需要收集，是不是每做一批試驗(yàn)，都需同時(shí)操作兩臺(tái)集菌儀？陰性對(duì)照能否每一批溶劑，稀釋液，沖洗液抽一、兩瓶做陰性對(duì)照？
答：不一定每做一批試驗(yàn)，都需同時(shí)操作兩臺(tái)集菌儀。 陰性對(duì)照不應(yīng)該僅僅每一批溶劑，稀釋液，沖洗液抽一、兩瓶做陰性對(duì)照，應(yīng)盡可能將所用到的每瓶都留少量做陰性。
87. "每一張膜總沖洗量不得超過1000ml,這個(gè)總沖洗量包括樣品溶液?jiǎn)幔?
答：不包括。
88. 無菌性檢查，培養(yǎng)基是直接拿去培養(yǎng)，還是按照說明書滅菌處理后再拿去培養(yǎng)？
答：成品培養(yǎng)基直接培養(yǎng)；脫水培養(yǎng)基或自己配制的培養(yǎng)基滅菌后拿去培養(yǎng)。
89. 液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基（中檢所）極易被氧化，藥檢所做實(shí)驗(yàn)時(shí)是將管裝量定在多高？
答：我們所用的是全封閉一次性濾筒，裝量100ml，高度約6.5cm。
90. 如果培養(yǎng)過程氧化層高度已超過藥典中要求的1/2高度，并發(fā)現(xiàn)其中長(zhǎng)菌，結(jié)果如何判定？若未長(zhǎng)菌，結(jié)果判定認(rèn)為無菌是否成立？此類問題應(yīng)該如何衡量？
答：如果培養(yǎng)過程氧化層高度已超過藥典中要求的1/2高度，并發(fā)現(xiàn)其中長(zhǎng)菌，可判斷為不合格；若未長(zhǎng)菌，按藥典，結(jié)果判定認(rèn)為無菌應(yīng)不成立；此類問題應(yīng)該照藥典執(zhí)行，培養(yǎng)后不超過1/2高度。
91. “無菌性檢查中每批培養(yǎng)基隨機(jī)取不少于5支（瓶）”,這句話中的“5支（瓶）”是5支或5瓶，還是5支和5瓶？”
答：或
92. 潔凈區(qū)與陽性實(shí)驗(yàn)室空調(diào)系統(tǒng)應(yīng)如何分別設(shè)置？送風(fēng)分離，回風(fēng)分離，或兩者均分離？即2套空調(diào)系統(tǒng)？
答：2套系統(tǒng)互不相干。
93. 十四烷酸異丙酯若經(jīng)驗(yàn)證后，不影響陽性菌生長(zhǎng)，可否濕熱滅菌？
答：濕熱滅菌的水蒸氣可能會(huì)影響十四烷酸異丙酯的性能，建議按藥典。
94. 沖洗液的濾清，加入不渾濁，是否可不用過濾？
答：可
95. 無菌檢查時(shí)，陽性對(duì)照的接種與培養(yǎng)是否也必須和供試品培養(yǎng)同一天進(jìn)行？
答：應(yīng)同步操作。
96. 使用的消毒劑應(yīng)無菌，比如購買的新潔而滅要用無菌的4.5微米濾膜過濾再用嗎？
答：如用在關(guān)鍵地方，建議過濾。
97. 產(chǎn)品穩(wěn)定性考察，有無菌檢查項(xiàng)目，請(qǐng)問留樣產(chǎn)品的無菌檢查的數(shù)量和常規(guī)檢查的數(shù)量要一樣嗎？如果是，留樣量就會(huì)相當(dāng)大，有的藥品比較貴重，這樣會(huì)造成企業(yè)較大的損失.
答：無菌檢查的數(shù)量和常規(guī)檢查的數(shù)量應(yīng)一樣。 按藥典穩(wěn)定性試驗(yàn)指導(dǎo)原則附表，該做就應(yīng)做，但若情況特殊，或許可減低檢驗(yàn)頻次，但如此一來，可能一些藥品注冊(cè)審評(píng)專家或GMP檢查員會(huì)有不同意見。穩(wěn)定性試驗(yàn)的無菌檢查很大程度是在考察包裝。
98. 做培養(yǎng)基適用性與方法驗(yàn)證時(shí)，若加菌量為100~120cfu＞100cfu，是否需要重新做驗(yàn)證？
答：要。
99. 藥典只是提供了化藥中干擾物的中和劑方法，能否提供一些中成藥的除菌方法？
答：無
100. 潔凈區(qū)污染霉菌怎么處理？
答：可嘗試甲醛熏蒸
101. 潔凈區(qū)有霉菌生長(zhǎng)，要怎么凈化環(huán)境？注：我們用75%的乙醇抹洗全部空間，然后開臭氧半小時(shí)，但是檢測(cè)后還是發(fā)現(xiàn)有霉菌，老師是不是還有更好的方法？
答：可嘗試甲醛熏蒸
102. 老師說的酒精棉過一段時(shí)間會(huì)生長(zhǎng)細(xì)菌，請(qǐng)問酒精棉保存期多久？
答：未考察，我們使用期一般不超過一周。
103. 酒精棉怎樣取樣進(jìn)行微生物檢查？
答：請(qǐng)自行設(shè)計(jì)
104. 酒精棉有規(guī)定超過多少的菌數(shù)不能再用？
答：無規(guī)定
105. 廣州環(huán)凱有凍干菌粉賣，是否可以在其單位購買？
答：建議向中檢所購買。
106. 請(qǐng)問藥典說“當(dāng)產(chǎn)品的組分或原檢驗(yàn)條件發(fā)生改變時(shí)，應(yīng)對(duì)檢驗(yàn)方法重新驗(yàn)證”，如何理解“原檢驗(yàn)條件發(fā)生改變”
答：比如，將沖洗量500ml改為300ml，等等。
107. 靈敏度檢查：改良馬丁和硫乙醇酸性流體培養(yǎng)基都要做6種菌株嗎？
答：硫乙醇：4種，為金葡、銅綠、枯草、生孢； 馬?。?種，為百念、黑曲。
108. 清潔后的潔具需用微生物純化水洗滌？
答：清潔后的潔具需用純化水洗滌。
109. 無菌：陽性對(duì)照培養(yǎng)48~72小時(shí)就可以滅活了嗎？不用跟供試品培養(yǎng)14天嗎？
答：是的
110. 供試品處理時(shí)，需加入適量的聚山梨酯80，聚山梨酯80需要滅菌嗎？方法如何？
答：需滅菌，可采用濕熱滅菌。
111. 含0.05%（v∕v）聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液如何配制？
答：可直接用聚山梨酯80配制，或先配制聚山梨酯80的濃溶液，然后取濃溶液作進(jìn)一步配制。
112. 如何證明“表面活性劑，中和劑或滅活劑使用應(yīng)有效性及對(duì)微生物無毒性”？
答：自行設(shè)計(jì)
113. 抗生素效價(jià)室放在潔凈室里面是否合適？
答：應(yīng)與潔凈區(qū)分開。
114. 最后滅菌產(chǎn)品的原輔料是否需要做微生物限度檢查？
答；一般情況應(yīng)做。
115. 薄膜過濾法若試驗(yàn)沖洗量1000ml陽性用量多少？
答：也1000ml。
116. 無菌用培養(yǎng)基是否不用對(duì)照培養(yǎng)基？
答：是
117. 無菌檢查法從開始制樣到加入培養(yǎng)基也不能超過1h嗎？
答：一般情況應(yīng)該如此。
118. 薄膜過濾法濾膜若＞50mm，沖洗量是否需調(diào)整？如何調(diào)整？
答：建議按藥典規(guī)定，選用直徑約50mm的濾膜。如要調(diào)整，即重新驗(yàn)證。
119. 陽性菌接種使用生物安全柜后，那接種室的空調(diào)系統(tǒng)能否與微生物限度檢查室共用？如果現(xiàn)在共用了，有什么方法能避免交叉污染？
答：請(qǐng)掌握原則，凈化系統(tǒng)應(yīng)分開。
120. 怎么消毒在試驗(yàn)中要用的無菌溫度計(jì)？
答：我們沒有這方面的經(jīng)驗(yàn)。
121. 發(fā)酵分裝容器要預(yù)先滅菌，請(qǐng)問分裝時(shí)是否有要求在無菌的環(huán)境下進(jìn)行，分裝后再進(jìn)行滅菌，程序是否復(fù)雜化？
答：我們不明白該問題，一般而言，既然容器要預(yù)先滅菌，分裝也應(yīng)無菌操作。
122. 無菌檢查用的菌懸液是否必須用新鮮培養(yǎng)制備？用于制備菌懸液的培養(yǎng)物可否在25℃條件下連續(xù)使用一周？
答：請(qǐng)按藥典10版要求，否則，自己驗(yàn)證。
123. 滅菌鍋壓力表檢定時(shí)，只檢定了滅菌鍋的溫度是否可以？若只檢壓力呢?
答：請(qǐng)咨詢檢定機(jī)構(gòu)。
124. 薄膜過濾法檢水驗(yàn)證？
答：不明白問什么。
125. 潔凈室的無菌采樣區(qū)域是否相當(dāng)預(yù)處理操作？
答：不明白問什么。
126. 飲用水檢測(cè)中GB標(biāo)準(zhǔn)中“總大腸菌群檢出應(yīng)進(jìn)一步檢驗(yàn)大腸埃希菌或耐熱大腸菌群”，是否可以只做大腸埃希菌？
答：我們目前尚未開展水質(zhì)檢驗(yàn)。